De gelijktijdige bepaling van cortisol en dexamethasone geeft laboratoria aanvullende analytische context binnen hetzelfde serum of plasma monster. Naast cortisol wordt ook informatie verkregen over de aanwezigheid en concentratie van dexamethasone. Cortisone wordt binnen dezelfde methode meegenomen als aanvullende endogene glucocorticoïdparameter.

Deze combinatie maakt de dataset completer voor research toepassingen waarin endogene glucocorticoïden en dexamethasoneblootstelling binnen hetzelfde onderzoeksprotocol worden geëvalueerd.

De methode maakt gebruik van UHPLC-MS/MS met MRM detectie. De combinatie van chromatografische scheiding, massaselectieve detectie en gedeuteriseerde interne standaarden ondersteunt selectieve kwantificatie binnen één analytische workflow.

De Cortisol & Dexamethasone LC-MS/MS kit is geschikt voor humaan serum, EDTA plasma en lithium heparine plasma. Daarmee sluit de kit aan op verschillende monstermatrices die binnen laboratoriumonderzoek worden gebruikt.

De kit is beschikbaar in twee configuraties, afhankelijk van de gewenste monstervoorbereiding: de Evaporation Method en de SPE Method.

De 1320E KIT M CCD is ontwikkeld voor de Evaporation Method. Deze workflow bestaat uit eiwitprecipitatie, centrifugatie, verdamping onder stikstof en reconstitutie voorafgaand aan LC-MS/MS analyse.

Deze configuratie is bedoeld voor laboratoria die een praktische en kosteneffectieve sample preparation willen implementeren. De Evaporation Method vereist geen SPE-stap en beperkt de behoefte aan aanvullende consumables. Afhankelijk van de beschikbare laboratoriuminrichting kunnen vloeistofhandelingen semi-geautomatiseerd worden.

De 1320S KIT M CCD is ontwikkeld voor de SPE Method. Deze workflow maakt gebruik van solid phase extraction voor uitgebreidere sample clean-up voorafgaand aan LC-MS/MS analyse.

De SPE Method kan relevant zijn voor laboratoria die extra matrixverwijdering, contaminatiecontrole of analytische gevoeligheid willen realiseren. Afhankelijk van de beschikbare infrastructuur kan deze workflow worden gecombineerd met geautomatiseerde SPE platforms of SPE compatibele liquid handling systemen.

De analytische performance van de Evaporation Method is technisch gevalideerd. De SPE Method is aanvullend geëvalueerd door methodevergelijking met de Evaporation Method.

In de technische validatie werden limits of quantification vastgesteld van 0,785 nmol/l voor cortisol, 0,916 nmol/l voor cortisone en 0,500 nmol/l voor dexamethasone. Repeatability CV’s lagen, afhankelijk van analyte en concentratieniveau, tussen 0,6 en 6,2 procent. Voor de vergelijking tussen de Evaporation Method en de SPE Method werden correlatiecoëfficiënten gevonden van 0,9988 voor cortisol, 0,9983 voor cortisone en 0,9855 voor dexamethasone.

Accuracy en trueness zijn beoordeeld tegen vooraf gedefinieerde target ranges. Voor cortisol werd accuracy geëvalueerd met externe materialen over een target midpoint range van 232 tot 800 nmol/l. Trueness werd voor cortisol, cortisone en dexamethasone beoordeeld met calibrator en control materialen over relevante concentratiegebieden. De experimenten voldeden aan de vooraf gedefinieerde acceptatiecriteria.